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domingo, 21 de agosto de 2011


EXPERIMENTO 2

                       PUNTO ISOELECTRICO DE AMINOACIDOS Y PROTEÍNAS

 Objetivos:


  • *       Determinar los pKa de un aminoácido polar con carga y un aminoácido no polar, mediante titulación con álcali.


  • *       Estimar el punto isoeléctrico de los aminoácidos polares y no polares del gráfico de pH vs volumen de base.


  • *       Determinar el punto isoeléctrico de una proteína mediante  la técnica de precipitación.


Introducción:

            El punto isoeléctrico se define como el pH en el cual el número de cargas positivas se iguala al número de cargas negativas que aportan los grupos ionizables de una molécula. En el punto isoeléctrico la carga neta de la molécula es cero (0). En los aminoáci­dos los grupos ionizables corresponden a grupos carboxilos, amino, fenólicos y tiólicos.

Aminoácido
Abrev
Letra
pKa1
pKa2
pKa3
Glicina
Gly
G
2.35
9.78

Alanita
Ala
A
2.35
9.87

Valina
Val
V
2.29
9.74

Leucina
Leu
L
2.33
9.74

Isoleucina
Ile
I
2.32
9.76

Metionina
Met
M
2.13
9.28

Prolina
Pro
P
1.95
10.64

Fenilalanina
Phe
F
2.20
9.31

Triptofano
Trp
W
2.46
9.41

Serina
Ser
S
2.19
9.21

Treonina
Thr
T
2.09
9.1

Asparragina
Asn
N
2.14
8.75

Glutamina
Gln
Q
2.17
9.13

Tirosina
Tyr
Y
2.20
9.21
10.46 Fenol
Cisterna
Cys
C
1.92
10.7
8.37 Sulfhidrilo
Lisina
Lys
K
2.16
9.06
10.54 ε-Amino
Arginina
Arg
R
1.82
8.99
12.48 Guanidinio
Histidina
His
H
1.80
9.33
6.04 Imidazol
Acido aspáratico
Asp
D
1.99
9.90
3.90  β-COOH
Acido glutámico
Glu
E
2.10
9.47
4.07  γ-COOH
               

Los aminoácidos y las proteínas son menos solubles en su punto isoeléctrico si las demás condiciones permanecen iguales. Esto se debe a que los iones dipolares no presentan carga neta y cristali­zan en forma de sales insolubles a ese pH.



Materiales y reactivos:

           
 




ác. glutámico 
Tras inhalación: aire fresco.  
Tras contacto con la piel: Lavar con agua.  
Tras contacto con los ojos: aclarar con agua.  
Tras ingestión  (grandes cantidades): consultar  al médico si subsiste malestar


glicina al 0.5%

 Inhalación: Trasladar al afectado al aire fresco
Nauseas, vómitos, diarrea, tos, dificultad respiratoria, dolores 
abdominales.
Condiciones médicas que se verán agravadas con la exposición 
al producto:
Quitar la ropa contaminada y lavar en forma abundante la 
piel con agua fría y jabón.


H Cl 0.1M

inhalación produce irritación de las mucosas, dolores retroesternales 
y epigástricos, edema pulmonar y de laringe.
ojos produce irritación y quemaduras que pueden producir  opacidad de córnea, en algunos  casos de carácter irreversible. 
Peligros para el medio ambiente: Puede afectar la vida animal y vegetal por su carácter ácido, en  función de la concentración y tiempo de exposición.


NaOH 0.2M
Inhalación: La inhalación de polvo o neblina causa irritación y daño del tracto respiratorio. En caso  de exposición a concentraciones altas, se presenta ulceración nasal. 
A una concentración de 0.005-0.7 mg/m se ha informado de quemaduras en la nariz y tracto. En  estudios con animales, se han reportado daños graves en  el tracto respiratorio, después de una  exposición crónica.


etanol
Inhalación: 
 Los efectos no son serios siempre que se use de manera razonable. Una inhalación prolongada de concentraciones altas (mayores de 5000 ppm) produce irritación de ojos y tracto  respiratorio superior, náuseas, vómito, dolor de cabeza, excitación o depresión, adormecimiento  y otros efectos narcóticos, coma o incluso, la muerte.


éter 
Es un líquido inflamable, muy volátil y que puede formar peróxidos explosivos, por lo que existe 
un alto riesgos de fuego y explosión. Los vapores pueden llegar a un punto de ignición, prenderse y 
transportar el fuego al lugar que los originó, además pueden explotar si se prenden en un área cerrada.  
Además, debido a que su punto de autoignición es bajo y puede generar electricidad estática, debido a 
que no es conductor, el riesgo de incendio o explosión aumenta. 
Las mezclas aire-éter que contengan mas de 1.85 % en volumen de este último, son 
explosivamente peligrosas. Por otra parte, al agitar éter anhidro puede generar suficiente electricidad 
estática como para iniciar un incendio. 



Diseño experimental 







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